K~+、Na~+、Ca~(2+)同心轴ISM的制备

离子选择性微电极(ISM)应用于生物医学组织细胞方面的研究，由于尖端小(1μm左右)，采用中性载体PVC膜。故电极阻抗很高(大约10¹⁰~10¹¹Ω)以及硅化、液膜长度等问题，使电极测试困难、稳定性较差、响应时间较慢并且寿命较短。针对这些向题我们参考了国外文献试制了同心轴ISM，改善了上述这些问题，并初步成功地进行了蛙缝匠肌肌细胞内K+的动态检测。

制作过程

1、毛细玻璃管的准备:用二根毛细玻璃管。一根外径2mm、内径1.6~1.7mm、长9cm作为外套管。一根外径1.6mm、内径1.3mm、长9cm作为内管(里面放入微丝)然后用酸、碱、醇处理后烘干。

2、毛细玻璃管的拉制:把处理好的毛细玻璃管用微电极拉制机拉成微电极，外套管颈部拉得短些，内管的颈部拉得长些并磨掉或用细玻璃棒碰掉尖端使其达5μm左右(见图1)。

3、制作过程[1、3、4]外管必须经过硅化处理(用15%六甲基二硅胺烷咄吮液注入尖端，液柱长1-2mm，半小时后放入烘箱250℃，烘1~2小时。然后注入配制好的敏感膜(K+、Na+、CaZ十等)液柱长200~50μm。内管注入内充液(注意不能有气泡)，然后小心地将内管插入到外套管中，在显微镜观察下，用平向推进器(可用显微镜移动尺自制)轻轻地沿轴向推动内管，使其尖端到达离外管尖端10~20μm后用502胶水将内管粘住，待干后播入银氯化银丝作内参比极电即可使用。

性能测试朗

测试仪器:用高阻抗离子计(我室自制)〔7〕

1.线性范围和检测下限:

K⁺一ISM:用八支尖端直径1.25μm的K⁺一ISM进行测试。在含0.2MCaCI₂离子强度的钾系列溶液中，线性范围10^-1一10^-4M平均斜率53.8mV(SD=1.45)，平均检侧下限5.6x10^-5M。在含有Tyrode液的钾系列溶中，线性范围10^-1一10^-4M，平均斜率51.7mV(SD=3.1)，平均检测下限5.6 x10^-5M。(见图2)

CaZ+一ISM:在含Tyrode液的钙系列溶液中，线性范围10^-1一10^-4M，平均斜率27.6mV。(见图3)

Na+一ISM:(见图4)

(注:尖端口径越小，斜率越小，线性范围越狭)

2.K+一IsM选择性系数K^p_j ,^t_j

采用固定干扰离子法，分别测定K⁺一ISM(领氨霉素)对Na⁺、CaZ⁺、MgZ⁺、Li⁺、NH⁺的选择系数K^pot_K+li(见表1)

3.重现性及德定性(K⁺一lsM)

室温下(25℃)将活化后的一支尖端直径为1.25μm的K+-ISM在10^-4一10^-1含0.2MCaCI₂的钾系列溶液中反复测定数次。每次测定后均用去离子水清洗至空白电位。(见表2)。