全自动尿有形成分分析仪及其临床应用
1995年日本东亚公司((TOA)开发了世界上第一台全自动尿有形成分分析仪,商品名为Sysmex UF-100。此分析仪利用流式细胞术原理,对未离心尿中有形成分的DNA、细胞膜进行染色,然后测量细胞的前向散射光和前向荧光两种参数,应用多参数算术法则进行直接计算和分析,可识别和计数尿中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型及细菌等5种有形成分的量[1]。已证明UF-100分析结果的重复性、准确性均较传统方法好。该仪器主要特点是能全自动分析尿液标本,速度快(约100份/h),无需离心;能筛选出需做显微镜检查的标本;能提供显微镜检查不能获得的信息,如红细胞形态;能显示各有形成分分布的散点图和红细胞、白细胞直方图。
本文着重对该仪器的检测原理和部分参数的临床应用作一综述。
测量原理
全自动尿有形成分分析仪的检测基本原理和步骤如下[2]。.
一、仪器进样口吸取800μL尿液,由标本 旋转阀将400匹尿液移至反应装置。
二、反应装置中,标本(400μL)和染色液(40μL)及稀释液(1 160μL)混合,其中的有形成分被稀释后再被菲吮、竣花青染料染色,.然后进入鞘流室,同时在标本流动的管道两端设有电导传感器,可测量电阻,得出尿电导率。
三、经标本鞘液注射装置注入流动室的标本,在鞘液作用下形成鞘流,鞘流中细胞经氢激光束照射后,产生前向散射光和荧光。
四、前向散射光和荧光信号经信号分析装置处理,转换成前向散射光强度(forwardscattered light intensity, FSC)、前向散射光脉冲宽度(forward scattered light pulse width,FSCW)、荧光强度(florescent light intensity, FL)和荧光脉冲宽度(fluorescent light pulse width,FLW)等4种参数,与电阻脉冲信号一起传入微处理计算器处理。其中FSC反映细胞横切面大小,FSCW反映细胞大小,FL反映细胞染色程度,FLW反映细胞染色部分的大小。
五、最后,仪器将尿中颗粒分成3类:红细胞、白细胞+上皮细胞和细菌分布在FSC和FL的散点图上;上皮细胞分布在FSCW和FLW的散点图上;管型分布在FSCW, FL和电阻信号的散点图上。荧光屏上显示两幅散点图和5种有形成分的计数结果,仪器共检测分析9μL尿液,以个/μL、个/高倍视野(HPF)或个/低倍视野((LPF)定量和定性的两种方式报告结果。
六、仪器报告参数如下
1.定量参数:红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、上皮细胞(EC)、管型(cast)和细菌(BACT)。
2.警告和复查参数:有包涵体的病理性管型((Path. cast)、小圆上皮细胞((SRC)、酵母样菌(YLC)、结晶(crystal)、精子(sperm)、高敏感状态细菌检出数(H-BACT count)、总颗粒计数值(total count)和未作分类的颗粒数(others)。
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