非线性工作曲线法在760系列分光光度计中的应用

　　一、概述

　　在分光光度分析中，吸收定律[’]所描述的A和C成线性关系，只有当浓度低通常<0.01M时才能成立。基于吸收定律制定的分析计算方法，本文称为线性工作曲线法。实际上这种方法只能用于低浓度分析，或范围狭窄的高浓度分析。这是分光光度法的一个弱点或不足之处。为了克月田之个缺点，就必须考虑应用A和C之间的非线性关系进行分析计算。从分光光度分析发展史来看，在分光光度计未广泛采用计算机之前，由于仪器质量和计算复杂等原因，采用非线性工作曲线法来扩大分析范围难于实现。现在，我总厂已研制和生产了760系列分光光度计，该系列产品杂散光极低;测光电子系统精度高、噪声低、测量范围宽;均配置了计算机，带有多功能的分析操作软件，其中有1一3次曲线拟合功能。这就为非线性工作曲线法的推广应用提供了有利条件。

　　随着现代分光光度计不断改进和更新，利用非线性工作曲线法扩大分析浓度范围，不断完善和提高分光光度分析技术是很有意义的〔i.zl0

　　二、基本原理

　　在分光光度分析中，基于发展和创新的观点，就应该不仅考虑低浓度的分析，而且要考虑高浓度的分析。我们把被测溶液的浓度(C)和在最大吸收峰处的吸光度(A)的关系用以下公式表示:

　　即C是A的函数，将(1)式用泰勒级数展开为幂级数形式:

　　式中a0,al,a2...an是与变量C和A无关的常数。

　　如果分析浓度低，可令(2)式中n二1，系数a2 , 83…为零，就得到下式

　　(3)式可认为吸收定律的另外一种描述方式。

　　如果浓度较高，(3)式将不能精确描述A和C之间的定量关系。随着浓度C的增加，必须使n> 1,(2)式才能精确描述A和C之间关系。因此我们把A和C之间的关系用下面一个n次方程来定量描述:

　　上式为非线性工作曲线法基本公式。

　　从当前分析仪器和方法所达到水平来看，用三次方程(n=3)已足够精确了。因此，在一具休的软件编制或直接分析计算中，通常考虑三次方程:

　　先配置一系列的具有不同浓度的标准溶液，分别在选定波长测其吸光度。然后根据多级回归最小平方拟合图工作曲线的方法计算出系数8p .818y 83，并存入计算机。当分析样品时，在相同条件下测量样品溶液的吸光度A后，计算机就自动调出上述系数ap,a},a:和a3，并根据公式(5)计算出A值所对应的浓度C，即分析结果。

　　三、采用非线性工作曲线法的优点:

　　根据非线性工作曲线法基本原理和实际应用情况，我们把此法的优点归结如下: