液相色谱仪最小检测浓度测量结果的不确定度评定

　　1　概述

　　根据JJG 705-2002《实验室液相色谱仪检定规程》,液相色谱仪主要考核的性能是输液系统泵的流量稳定性,柱箱温度的稳定性,检测器的基线噪声、基线漂移、最小检测浓度,定量重复性和定性重复性等指标。输液泵的稳定性和柱箱温度的稳定性直接影响检测器的基线稳定性和仪器测量的重复性。在试验条件下,用标准物质、微量进样器检测液相色谱仪最小检测浓度;用积分仪或游标卡尺测量基线的噪声幅度。测量结果的不确定度就由上述这些因素确定。

　　2　数学模型

　　液相色谱仪常见的检测器有紫外-可见光检测器、二级管阵列检测器、荧光检测器和差示折光率检测器等。根据液相色谱仪定量分析的方法,各种检测器的最小检测浓度的计算公式是相同的。其公式为:

　　式中:CL—最小检测浓度(g/mL);Nd—基线噪声峰-峰高(mm); C—标准物质的浓度(g/mL);H—标准溶液的色谱峰高(mm); V—进样体积(uL)。

　　根据不确定度的传递由(1)式得出:

　　式中各不确定度分量彼此独立,灵敏系数为1。

　　3　不确定度各分量及分析

　　3. 1　不确定度各分量

　　3. 1. 1　基线噪声测量的不确定度μreι1

　　基线噪声测量的不确定度主要来自卡尺检定的不确定度和用卡尺测量的不确定度,一般为0.02。如果用色谱工作站记录基线噪声,则其不确定度优于0. 01。

　　3. 1. 2　峰高测量值的相对不确定度μreι2

　　峰高测量不确定度主要为进样的重复性和泵的稳定性,规程规定进样6次,定量重复性为3%,所以:

　　3. 1. 3　标准物质的相对不确定度μreι3

　　标准物质的相对不确定度是测定液相色谱仪检出限的不确定度的主要来源,直接影响检测结果,标准物质的相对不确定度由标准物质证书给出,检定液相色谱仪的国家标准物质GBW(E),其定值不确定度为5%,包含因子K=3,所以:

　　3. 1. 4　进样体积的相对不确定度μreι4

　　进样体积的相对不确定度主要来源于微量进样器的刻度的体积。微量进样器的校准,根据规程规定一般称量6次,相对标准差1%,所以:

　　3. 2　不确定度分析

　　为噪声测量的相对不确定度为标准物质的相对不确定度为进样体积的相对不确定度μreι4,其中还有取样时人的视力差异以及微量进样器校准时和使用时的温度差异引入的不确定度,通过大量的实验表明,在控制好实验条件的情况下,这些因素引入的不确定度可忽略不计。为峰高测量的相对不确定度μreι2。

　　4　不确定度的合成