喇曼微探针的新发展-共焦激光喇曼

　　喇曼微探针又称作喇曼显微镜，是显微镜与喇曼光谱仪的组合系统。最早使用喇曼微探钊一研究很小的样品或者显微镜可见夹杂物是法国的Delllye。所以、喇曼探钊一又称作oelhye分子微探针，意味着能在分子水平_L给出物质结构信息。旱期的喇曼微探针山单道检测的喇燮光谱仪与显微镜组合而成。80年代中期光学多道分析仪有了很大发展，出现了新一代多道检测喇燮微探针。近年出现的共焦显微镜，具有二维分辨能力，能作“光学切片”、在生物学和其他一些领域有很高的应用价值。采用共焦设计的喇曼微探针—共焦激光喇曼(C、L、R.)是法国EG&GDll’)r公司最新发展的新力一法。他把共焦显微镜的潜力扩展到喇曼微探针上。

　　一、喇曼微探针

　　1、单道检测喇曼微探针。普通的单道检测喇曼微探针一由显微镜和用光电f音增管作单道检测的喇曼光谱仪组成。激光经过显微镜的物镜聚焦照射在样品上显微镜给出它的标准显微镜像。与此同时，它的喇曼散射山同一个物镜集，经光学系统送到喇曼光谱仪检测、记i挤，听得喇曼光谱表示出那个狭小聚光区的化合物的组成和含量。对川司质样品，得到的微区谱，代表了整个样品的喇燮光谱对十异质样品，可以逐点对它们进行分析还可以用激光逐点扫描样品，同时选择一种组合的某一喇曼位移线(不与其它组分的位移线重叠)跟随作图，得到的所谓喇曼地形图(Ra.二anmapp.ng)真实地农现出该组分在样品中的分布。图一是含有甲烷包裸体的石英的喇曼地形图口几氧化硅用465cm一l线作图，甲烷用Zt)14cln’线作图。

　　喇曼微探钊有样品用量少，能测量很微小的质点、非破性，能作原位分析等优点_‘已观测的点叮以小至l只知m.样品的量可以少至10-9”至10一12g，在材料科学、地球科学、生命科学等领域是一种很有用的工具。在生物学和医学L用它来测定细胞、组织的外来夹杂物，在临床和组织学方面已有很多成功的例子。例如测定肾结石、皮肤中的嘌呤沉积物、组织中的珐琅质、淋巴结巨细胞和鱼肝中的异物等等，喇曼微探针有普通喇曼光谱仪相同的功能，能作普通喇曼光谱仪的各种工作例如用它来研究蛋白质、核酸、生物模等重要的生物大分子结构，了解它们的构象和环境因素，分子间的相互作用，以及物理化学因素引起的结构变化。进而理解它们的结构功能关系。在细胞膜和细胞中存在大量含有生色团的物质，例如血红素类蛋自质、叶绿素、视觉色素、类葫萝卜素等等。生色团常常处于分子的活性部位、具有重要的生物学功能。如果在显微镜下结合共振喇曼增强方法进行测定，灵敏度很高，可以免除很多繁难的分离提纯工作，直接从细胞膜和细胞中获得这些物质的结构、结构变化，以及和其他物质相互作用的信息。