液相色谱-质谱联用仪校准方法探讨

　　液相色谱-质谱联用仪是将液相色谱仪与质谱仪通过一定接口耦合到一起的分析仪器， 它既能用于定性分析又能用于定量检测，在有机化学、生物化学、石油化工、环境保护、食品安全、农业科学、生命科学、医药卫生等领域都得到了广泛的应用。 为了保证液相色谱-质谱联用仪测量结果的准确统一， 需要对液相色谱-质谱联用仪进行定期校准。 目前，我国没有液相色谱-质谱联用仪检定规程或校准规范，笔者通过查阅大量技术资料和多次实验，提出了以下液相色谱-质谱联用仪校准方法，供探讨。

　　一、校准条件

　　1.实验室环境要求

　　(1)仪器室内不得有强烈的机械振动和电磁干扰，不得存放与实验无关的易燃、易爆和强腐蚀性气体或试剂。

　　(2)实验室温度：15℃～30℃;相对湿度：≤70%。

　　2.试剂

　　标准物质：利血平：10.0ng/mL，基体为流动相;氯霉素：10.0ng/mL，基体为流动相。 调谐液：仪器厂家推荐的物质。

　　二、校准项目和校准方法

　　1.分辨力的校准

　　仪器稳定后，执行自动调谐命令。 注入调谐液，直到调谐通过，打印调谐报告，考查其中3～6个主要离子峰的半峰宽，以半峰宽的最大值作为仪器的分辨力W1/2。

　　2.质量准确性的校准

　　按照调谐条件注入调谐液，仪器调谐通过后，记录其中3～6个主要离子的实测质量数。 根据式(1)计算质量准确性，以绝对值最大的ΔM来评价质量准确性结果。

　　式中：Mi 测 量——— 第 i 个离子 3 次测量平均值 ，u;Mi 理 论———第i个离子理论值，u。

　　3.质量范围的校准

　　按照调谐条件，注入符合校准要求的调谐液，进行调谐和校准。 在设定的质荷比范围内 (如m/z为50~2000)，选择SCAN模式进行全范围扫描，以分辨力和质量准确性均满足计量性能要求的最低和最高质荷比范围作为质量范围。

　　4.信噪比的校准

　　以调谐确定的最佳参数作为校准参数。 选择C18或性能相当的色谱柱。

　　ESI 正离子 ： 注入 10pg 利血平 ， 选择 SIM 模式 ( 或MRM模式)，提取m/z=609特征离子(或其m/z=195的子离子)，根据式(2)计算信噪比：

　　式中：H———提取离子的峰高;H噪声———基线噪声。

　　ESI负离子 ：注入100pg氯霉素 ，选择SIM模式 (或MRM模式)，提取m/z=321特征离子(或其m/z=152的子离子)，根据式(2)计算信噪比。APCI正离子 ：注入10pg利血平 ，选择SIM模式 (或MRM模式)，提取m/z=609特征离子(或其m/z=195的子离子)，根据式(2)计算信噪比。

　　5.整机定量及定性重复性