蒸气压渗透计测定多糖分子量

　　1引言

　　根据高分子溶液的热力学性质，在同一温度下，溶液比溶剂的蒸气压下降(P:温度差(△T~T:一Tl)和溶液中溶解的这种大分子物质的分子量有关，基于这个热力学原理，利用灵敏度极高的热敏电阻作为关键性元件，设计制造成的蒸气压渗透计(Vapourpressure05-mometer，VpO)可用于测定脂溶性及水(Mn)，范围在sxl0¹一5X10⁴。

　　多糖是由许多单糖通过糖昔键联结而成的一类水溶性大分子物质，60年代以来，发现多糖能非特异性地刺激网溶液状内皮系统，从而提高机体的免疫功_能，在癌症及艾滋病等疾病的治疗中可能起到积极作用，因此对多糖的研究日趋深入。分子量是多糖的重要理化参数之一，分子量大小对多糖的生物活性、作用时间长短、剂型稳定性等有密切关系。本文着重介绍德国(前西德)KNAUER蒸气压渗透计的仪器性能及在多糖分子量测定中的应用。

　　2仪器和方法

　　仪器的主要构造见示意图(图2)，在一个保温套内有一个相对密闭的烧杯，底部盛有经脱气处理的新鲜双蒸水，在恒温下经2小时平衡，达到饱和蒸气状态，烧杯上部通过园锥形小孔插入有弹簧针头的注射器，仪器的核心灵敏度极高的热敏电阻，带有二个分叉形的测量头，通过往下压注射器分别往测量头上挂溶液和溶剂液滴，平衡5分钟左右，从记录器上读出△T值，每一个浓度测量三次，取其平均值，每种物质测5个浓度，在座标纸上画出△T/C对C的直线，直线的截矩为C~o时的么T/c数值，为该物质的K值，将已知分子量标准品的K。除以待测物的K¹即为待测物的分子量。含义为数均分子量五，单位g/mol。在实验采用Ph盯macia出品葡聚糖Dextran标准品B一512系列，丽石分别为900，3200，5200，7300，9200，26000，48000，检测样品有本所研制的柴胡多糖、猴菇多糖、当归多糖及军事医科院院内外送检的各种多搪二十余种，分子量范围由500一50000。

　　3结果和讨论

　　表1以柴胡各级多糖的分子量为例，列出VPO和凝胶色谱(GFC)、超速离心法(SCS)测得的数据

　　和膜渗透计法、凝胶色谱法、超离心法、光散射等方法比较，VPO的基线 平衡时间比较快、仪器价格较低、水溶液中有少数灰尘颗粒不受干扰等有利条件，是一种快速、简便，数据具有一定精确度的方法。

　　需要注意的是标准品的选择，一般在经过超滤机分级处理，已知待测样分子量的范围，尽量选用和它接近的标准品，就可提高测定的精确度，否则，会造成较大的误差。

　　鉴于水体系大分子物质的分子量测定方法较少，大多数方法在达到平衡状态需几小时甚至十几小时，VPO不失为一个较好的方法，值得推广。