ASTAR MP-120核酸自动提取仪的原理及应用
1 前言
核酸的分离与纯化技术是分子生物学实验的一项基本技术,从最初的目的基因提取到PCR产物纯化或“胶回收”、以及基因克隆中质粒的提取等实验过程,都离不开核酸提取纯化,生命科学在飞速发展,新讯息、新技术层出不穷,另外,随着生物和医学技术的快速发展,原有的手工纯化核酸的方法,已经很难满足大规模、高通量的实验要求,出现许多核酸分离与纯化的新技术及商品化试剂,其中采用磁珠分离是一种已被证实为高效、简便、易于自动化的可行方法。ASTAR MP-120 核酸自动提取仪是厦门欧达科仪发展有限公司基于核酸磁珠分离法而设计的仪器,其提取核酸的整个过程无需反复多次离心、萃取等步骤,而是通过磁棒带动磁珠的转移,来完成核酸的分离与纯化步骤,进而实现了样品中核酸提取的自动化。提取的核酸质量高,重复性好,且操作简单,结合磁珠法核酸提取试剂,可以从全血、血清、培养的细胞、动植物组织、微生物等多种样品中自动提取核酸,在生命科学领域及临床基因检测中有着极大的应用前景。
2 MP-120 核酸自动提取仪的原理
MP-120核酸自动提取仪基于磁珠分离法而设计,通过仪器里磁棒的运动,实现磁珠(结合有核酸)从样品处理液到核酸洗涤液,再到核酸洗脱液之间的转移,从而自动完成核酸分离与纯化的全过程。其过程与原理包括以下几个步骤:(1)吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混合,裂解细胞,释放的核酸特异性吸附到磁珠上,蛋白质等分子则不被吸附而留在溶液中,(2) 洗涤:在磁棒磁场作用下,磁珠与溶液分离,磁棒将磁珠继续转移至洗涤缓冲液里,反复洗涤,去除杂质,(3) 洗脱:然后将磁珠再转至洗脱缓冲液里,核酸就从磁珠上被洗脱下来,最后磁棒再将磁珠移出,就完成了核酸的提取。
3 MP-120 核酸自动提取仪的系统组成
MP-120 核酸自动提取仪的系统组成分为自动控制部分、机械部分和软件部分。仪器结构如图1所示,机械部分主要由磁棒、磁套及96孔板动送架组成。
MP-120 核酸自动提取仪软件配有八个常用标准动作:吸附、结合、搅拌、洗涤、内部晾干、外部晾干、洗脱、释放磁粒,可根据实际需要将标准动作进行组合,大大简化了规程的设计。软件部分的功能主要是通过定义和控制仪器磁棒、磁套的运动,带动磁珠在不同缓冲液之间的转移。磁棒转移磁珠的效率可达 95% 以上,这就保证了MP-120 能高效率地提取核酸。软件编辑灵活,可根据提取样品的不同,及不同核酸提取试剂的操作要求,编辑相应的核酸提取规程,进行核酸的分离与纯化。
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