利用LC自动进样器来降低样品过载

　　近年来，受新型质谱接口技术的影响，液相色谱(LC)技术趋向于向高灵敏度和高通量方向发展，因而需要进一步改善和发展进样技术。当使用短的小内径色谱柱时，分析物的保留体积非常小，应该优先考虑的就是减少柱外效应引起的峰展宽。

　　商品化的LC自动进样器大致分为两类。在最广泛使用的仪器中，随着阀的切换开始进行色谱分离，此时进样针就成为高压流路系统的一部分。在常规系统中，进样针总在常压下运行^[1] 。前一类型的自动进样器需要较少的样品引入时间，在高灵敏度分析中通常记忆效应比较小。而记忆效应随LC动态范围的提高变得尤为重要^[2-4] 。后一类型的自动进样器在组建耐高压的系统(例如，超过80 MPa)时成为首选。

　　对于两种类型的自动进样器，收集到的样品液通过流路转换装置(如切换阀和一些连接管)转移到分离柱。本质上讲，样品溶液和流路内壁产生接触。在色谱运行中，在内壁表面的某些部分往往难以进行清洗，从而引起记忆效应或样品过载。此外，众所周知，在分离过程中分离柱前的阀和连接管也会引起谱峰展宽。

　　一种新型自动进样器应运而生，可以将样品直接转移到色谱柱而不用任何流路转换设备和连接管。除了在常规系统中用到的六通阀以外，设计了一个新的直接进样阀(DIV)应用于这种自动进样器。本文对该自动进样器的结构和性能进行了探讨。

　　1 实验部分

　　1.1　DIV安装

　　本研究使用的自动进样器系统是配备了超声清洗设备的3133HTS Autosampler Z(Shiseido, Tokyo,Japan)。其结构的详细说明参见文献^[5] 。将一个Shiseido Irica Technology (SIT, Kyoto, Japan)生产的DIV安装在自动进样器上(图1)。利用一个附加的电子电路来确保DIV的两个位置(A和B)和切换阀同步，使这两个机械单元能够同时运行。管路连接与商品化模式的结构相比稍微做了改变，详细结构如图1所示。

　　该DIV有一个长孔，可将进样针引导至连接管的末端，从而将样品直接送入到分离柱。在状态A时，进样针插入DIV，并在连接管的末端反向加压。在向状态B过渡时，先将进样针从DIV中拉出，然后旋转DIV的上部，关闭该孔。由于引导进样针的孔的位置偏离中心，因此通过DIV顶部的旋转可以将它关闭。

　　在A状态，流动相的流动将样品从进样针载入到色谱柱，色谱分离开始。在状态B，进样针在样品瓶的位置，采集样本，然后用超声波清洗进样针的外表面，并将其移回到DIV阀。而来自泵的流动相通过封闭的DIV进入分离柱。

　　1.2　分离效率和过载评价