荧光分光光度计的结构与应用

　　荧光法的固有灵敏度高,取样量少，检测限通常比吸收光谱法低1~3个数量级,可达ng ﹒m l- 1级;线性范围也常大于吸收光谱,又有荧光寿命，荧光量子产率，激发峰波长，发射峰波长等多种参数因而有较好的选择性^[1] 。但也由于荧光法的高灵敏度,使得定量荧光法引入严重的基体干扰,荧光法在定量分析的应用不如吸收光谱法,因为吸收紫外可见光的物质种类要比吸收相应区域辐射而产生荧光的物质多。目前荧光分析法广泛应用于生化、化学、药物分析、食品检验、地理、冶金、医学、环境科学和生命科学研究等各个领域。

　　荧光仪器是用来测定荧光物质的性质和含量的分析仪器，通常分两大类：荧光光度计和荧光分光光度计^[2] 。荧光分光光度计技术在现代科学的发展中正显示出独特的作用，越来越得到人们的重视。下面将对荧光分光光度计的结构，分类，发展和应用作以简单介绍。

　　1 荧光分光光度计的结构

　　一般荧光分光光度计由光源、激发光源、发射光源、试样池、检测器、显示装置等组成。

　　1.1 光源

　　光源应具有强度大、适用波长范围宽两大特点,常用光源有高压汞灯、氙灯、氙- 汞弧灯等。此外，紫外激光器、固体激光器、高功率连续可调染料激光器和二极管激光器等荧光光源把荧光法的应用范围拓宽。

　　1.2 滤光片和单色器

　　在荧光光度计中，通常采用干涉滤光片和吸收滤光片作为激发光束和荧光辐射的波长选择器。在荧光分光光度计中至少选用一个，而常常是用两个光栅单色器，且均带有可调狭缝，以供选择合适的通带。理想的单色器应在整个波长区内有相同的光子通过效率，不幸的是这种理想的单色器不存在。

　　1.3 检测器

　　一般普通的荧光分光光度计均采用光电倍增管作为检测器。它是很好的电流源，在一定条件下其电流量与入射光强度成正比。此外，还有光导摄像管、电子微分器、电荷耦合器阵列检测器。

　　1.4 显示装置

　　以前，显示装置有数字电压表，记录仪和阴极示波器等，现在，人们可以通过计算机软硬件技术根据不同要求，来选择不同的直观的视频读出方式^[3] 。

　　2 荧光分光光度计分类

　　荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计，自动记录式荧光分光光度计，计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Shp ol’skill荧光分光光度计，配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。