液相色谱仪六通阀中残留物质对检定的影响及解决办法

　　1.前言

　　随着科学技术的发展，液相色谱仪在化学分析工作中扮演了越来越重要的角色。液相色谱仪主要由贮液瓶、输液泵、进样器、色谱柱(包括柱温箱)、检 测器和数据记录及处理装置组成。液相色谱仪的进样器可分为自动进样器和手动进样器两大类型。目前，手动进样器绝大多数都采用六通阀(见图1)。六通阀的优 点是进样量可变范围大，进样量也较大，分析和制备通用;进样量由固定体积的定量管或微量注射器控制，重复性好，可达0.5%;耐高压，可直接在高压下把样 品送人色谱柱，不需停流;如果装上电动或气动的驱动装置，可做到自动化进样。

　　进行样品分析时，在样品进人六通阀后，样品中的某些成份由于环境条件(溶剂极性、pH等)的改变，会沉积于六通阀中。使用过一段间后，尤其是分 析染料和饲料等样品的仪器，六通阀中往往沉积有大量以往样品的残留。在检定液相色谱仪时，由于色谱条件和分析样品时相差较大，这些残留物质可能会溶解，和 检定用标准物质一起随流动相进人检测器，得到的色谱图上会出现杂质峰(见图2)，影响检定结果的准确性。

　　2六通阀中沉积的残留成份对检定结果准确性的影响

　　检定液相色谱仪是根据《JJG705一2002液相色谱仪检定规程护]，用检定仪器的国家二级标准物质的保留时间和峰面积或峰高计算仪器的定 性、定量重复性及最小检测浓度的。定性重复性检定的依据是在可复现的色谱条件下，某组份色谱峰的保留时间仅与该组份的理化性质有关，只要能够分辨出色谱峰 尖，杂质峰的出现并不能改变其它被测组份的保留时间，不会影响定性重复性检定结果的准确性。定量重复性及最小检测浓度的检定的依据是通过检测器的物质量与 检测器的响应信号成正比，定量重复复性及最小检测浓度检定结果的准确性取决于响应信号(即色谱峰面积或峰高)的测量结果的准确性。

　　杂质峰的出现对色谱峰面积或峰高测量的影响取决于它和标准组份的色谱峰的分离情况I2J。图3、图4为在不同峰高比、不同分离度RS时的标准分 离度曲线。图中每个峰上的黑点表示每个峰尖的真实位置，在图3中可以看到，为准确测量峰高需要分离度为0.8，而图4中则要求分离度在1.0才能准确测量 蜂高。关于分离度对峰高测量的影响，大致可以认为，较低的Rs值会导致峰高偏大，对小峰而言，偏大更多。若Rs二1.0，相对峰高变化从128/1到1 /128，峰高测量准确度优于土3%。

　　图5展示了在分离度Rs司.0、不同峰高比时峰面积的测量误差。从中可以看出，小的分离度是如何影响峰面积测量的准确度的。一般而言，较大峰的 测量误差远比较小峰的的测量误差小。比较峰高和峰面积测量这两类方法，分离度不良时，测量峰面积的误差比测量峰高大。若Rs=1.0，峰高比变化从 128/1到l/128时，误差最大为3%。而峰面积测量在相同的误差水平下，峰高比变化大约从3/1到1/3。用峰面积定量比用峰高定量要求有更大的分 离度。