多波长线性回归分光光度法同时测定红色墨水中的酸性大红3R和弱酸红A

　　在司法鉴定及与之相关的商品检验工作中，有时需要测定红色墨水中的染料组成。有些红色墨水中的红色成分由酸性大红3R和弱酸红A两种染料混合配制而成，这两种染料的吸收光谱重叠，测定时相互干扰。曾有文献川报道用比值光谱一导数分光光度法同时测定红墨水中的酸性大红3R和弱酸红A，尚未见多波长线性回归分光光度法同时测定墨水中这两种染料的文献报道。本文采用多波长线性回归分光光度法同时测定红色墨水中的酸性大红3R和弱酸红A两种染料的配比，消除了酸性大红3R和弱酸红A的相互干扰，结果令人满意。

　　1基本分析原理

　　酸性大红3R和弱酸红A的吸收光谱重叠，测定时相互干扰，采用多波长线性回归分光光度法测定可消除这种干扰，达到同时测定这两种染料的目的。基本原理如下:

　　当酸性大红3R和弱酸红A的混合溶液服从Beer定律且吸光度满足加合性时，有:

　　式中A为混合溶液的吸光度，。为摩尔吸光系数，。为组分浓度，下标“3R”表示酸性大红3R，下标“A’，表示弱酸红A。

　　如果以弱酸红A的标准光谱做除数因子与式(l)相除，则有

　　式(2)为一直线方程，式中马R和:A可分别由两种染料的标准溶液测得。

　　在多个波长下测定A、龟R和。、，以刀叭对电R/。人进行线性回归，则得如式(2)所示的回归方程，则该方程的斜率即为酸性大红3R的浓度伪R，该方程的截距即为弱酸红A的浓度cA。

　　2实验部分

　　2.1仪器和试剂

　　U’V一9210紫外一可见分光光度计。

　　酸性大红3R和弱酸红A的标准溶液:分别准确称取酸性大红3R和弱酸红A，用蒸馏水溶解、定容配制而成。

　　2.2实验方法

　　在波长中汉)一叹刃nm范围内分别测定酸性大红3R和弱酸红A的标准溶液、两种染料的标样混合溶液和墨水样品的吸收光谱。在波长500一 530lun之间每隔Znm读取16个波长处的吸光度，用计算机按基本分析原理进行数据处理，计算两种染料的浓度。本实验中的数据处理均自编程序由计算机完成。

　　3结果和讨论

　　3.1吸收光谱

　　取酸性大红3R和弱酸红A标准溶液，分别测定它们的吸收光谱(见图1)，可见两种染料的吸收光谱重叠。

　　3.2吸光度线性范围及吸光系数的计算

　　分别配制酸性大红3R和弱酸红A的系列标准溶液(n=5)，在450一580nm波长区间扫描测量它们的吸收光谱，每隔2nm读取吸光度，并逐点进行一元线性回归，计算相关系数r和两种染料在不同波长下的。值。实验结果表明:在450一580r}rn波长区间和0-40mg/L浓度范围内，两种染料均服从Beer定律(r>0.996)0