荧光分光光度计的功能扩展

　1 前言

　　目前荧光分析技术在生物化学、药物分析、食品检验、医疗卫生、环境科学和生命科学研究等各个领域得到极其广泛的应用^[1] ，荧光分光光度计的使用越来越普及。

　　紫外-可见分光光度法是一种历史悠久，传统的分析方法,通常需要相应的紫外-可见分光光度计。已有文献报道利用荧光分光光度计实现紫外-可见分光光度计功能的实验方法^[23] ，但需要有专门制作的附件。本文提出在荧光分光光度计上实现紫外-可见分光光度计功能的简易新方法,即利用白纸片改变光路,使荧光分光光度计实现紫外-可见分光光度计的功能。

　　2 实验

　　2.1 仪器

　　实验室自制MYF多功能荧光分光光度计^[4，5] 或日立F-4500荧光分光光度计;日立DU-7400紫外- 可见分光光度计或岛津UV-2501PC紫外-可见分光光度计，UV-2501PC型带有反射测量附件。

　　2.2 实验方法

　　2.2.1 透光物质 在荧光分光光度计样品架位置以适当的角度放置白纸一张，使反射或散射光能进入发射单色器。若待测物为如滤光片之类的可支持物，直接立于光路中即可;若为溶液，则需置于样品池再放入光路中。待测样品置于激发单色仪和白纸之间(如图1所示)，亦可置于白纸与发射单色仪之间。

　　设置实验参数，以波长差Δλ=0nm进行同步扫描，以未放入待测物时扫描所获得数据作为白纸空白，再放入待测物，所得到的光谱数据与白纸空白相除进行校正，即可获得在荧光仪上待测物的透射光谱,根据需要可再转换为吸收光谱。

　　2.2.2 不透光物质 扫描不透光物质的反射光谱时，取走白纸，将样品以适当的角度放置于D位置，仍以Δλ=0nm进行同步扫描，所得结果仍与白纸空白相除进行校正以获得其反射率的谱图。

　　3 结果及讨论

　　荧光分光光度计的光路为直角构型，在光路中放入白纸，起了将入射光或经样品吸收后的透射光导入检测器的作用，导入光的光强与入射光或透射光成正比。故实验部分所介绍的方法(我们称之为纸片导光法)可用于在荧光分光光度计上实现吸收光谱的快速测量。分别选择对不同波长具有吸收的滤光片A(长波通)和B(短波通)进行实验，并对同一滤光片亦用紫外-可见分光光度计检测其透射率，结果显示：对于同一滤光片进行扫描，荧光仪的实验结果和紫外-可见分光光度计的实验结果一致，两种方法测得的透射光谱相当吻合(如图2的a和b所示)。