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巧用显微镜 提高测微术

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  1 测微术

  微生物因个体微小而得名,其大小一般只有几个至几十个微米,通常在显微镜下用目镜测微尺简称目微尺(以下同)进行测量。目微尺是一块圆形玻片,中央刻有一把5mm长,等分有100格的尺子。目微尺安装在接目镜中的隔板上(即光阑)上。人的眼睛通过目镜用目微尺测量放大后的微生物的大小,然后再根据镜台测微尺简称台微尺(以后同)的校正值换算出微生物的实际长度,这就是测微术。

  2 显微镜目镜的种类

  目镜有负目镜和正目镜。负目镜由两个平凸面透镜组成,在两个透镜之间有一个光阑。下面的透镜称视野透镜,它凸面向下,用于聚合来自物镜的光线,使它们聚焦成象于光阑附近。上面一个透镜为接目透镜。凸面也向下,它使影象放大易被眼睛的视网膜所接受。正目镜也是由两个平凸面透镜组成,但两个透镜的凸面是相对的。下面的视野透镜凸面向上,光阑在视野透镜的下面,其成象点在目镜外光阑处。正目镜主要用于计数或测量物体的大小与长度[1],负目镜也同样用于测微术[2,3]。

  3 目微尺每格的长度

  欧林巴斯生物显微镜配上不同的目镜进行目微尺校正,结果见表1。

  表1中江南牌光学生物显微镜的目镜为负目镜,其余均为正目镜。

  由表1可见:1)在10×负目镜、40×物镜下,台微尺1格等于目微尺6格,6×1·67≈10·00微米。在10×正目镜、40×物镜下,台微尺1格等于目微尺8格,8×1·25=10·00微米,这说明正、负目镜均可以测微;2)在放大100倍系统中,负目镜中目微尺每格长度为6·67,是正目镜中目微尺每格长度5·00的约1·33倍。在放大400倍系统中,负目镜中目微尺每格长度1·67,是正目镜中目微尺每格长度1·25的约1·33倍。可见在相同放大倍数下负目镜中目微尺比正目镜中大约1·33倍。用负目镜测微,尺子刻度较大、较清晰,易于观察测量;3)物镜不变,改变目镜放大倍数目微尺每格长度不变。这说明目镜由10×增至15×,目微尺与物体同步放大。即用同一生物显微镜测微,10×、15×目镜的测微结果是一样的;4)目镜不变,物镜由10×增至40×,物体放大倍数增加4倍,目微尺每格长度减少4倍,这说明在同一目镜下测微,使用10×、40×物镜的测微结果是一样的。

  4 不同生物显微镜的优缺点

  常用的国产生物显微镜(例江南牌)一般为负目镜,测微时把目微尺放在目镜两个透镜中间的隔板上,即光阑上[2,3]。江南牌生物显微镜可用16×目镜测微,由于放大倍数大,目微尺刻度和被测物体像均较大,测微方便。不足的是视野球面差较大,只能在很小范围内测微。常用的进口生物显微镜(例OLYMPUS牌教育实习用生物显微镜)一般为正目镜,目微尺放在10×目镜下部的压环上[4]。用这类生物显微镜测微,常用10×目镜与40×,100×物镜联用,放大倍数只有400×,1000×。由于放大倍数小,目微尺和被测物体均较小,视力差的学生测微较困难。欧林巴斯牌显微镜的15×目镜也是正目镜,但目微尺在15×目镜中线条较模糊,视力较好的学生测微也较困难。

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