凯氏氮/蛋白质测定法及其仪器评介

　　氮和蛋白质是一切生命活动的基础物质，是动植物和人类生存的最重要营养成分，所以在农业、畜牧业、食品工业、饲料工业等部门都十分重视氮/蛋白质的测定分析。早在150多年前，人们就在探索氮/蛋白质测定方法和仪器，如今较成熟的方法有杜马斯(Dumas)法、‘护子活化法、染料结合法、近红外光谱法和凯氏法(KJeldahl)等等。

　　杜马斯法创立于1831年，它是将待测样品和催化剂混合后在600℃以上高温中充分燃烧将有机物中的氮转化为氧化氮，再还原为氮气，测出含氮量，或进一步换算出蛋自质含量，由一f以往用氦气作载气，且需特种摧剂，测定成本高，陡样品仅要求儿十毫克，不宜用于测定多半是非均匀性的生物样棍:，近年来该方法和仪器有了新改进，用氧和二氧化碳作燃气和载气，月_样品量可扩一展到一支，测定一个样品仅需7一11分钟，所以欧洲又开始启川该方法和仪器，但由Jl仪器昂贵，我国尚未广泛应用。中子活化法是将样.拮用快中子轰击，使氮素活化成具有放射性的氮”，用放射性谱仪，即可测出氮的含量。此法快速，且不破坏样品，但仪器设备昂贵，难于推广。近红_外线漫反射光谱分析法，是近20多年来发展起来的方法具有样.拈制备简单、不使用任何化学试剂、测定快速等优点，但它是一种相关分析的方法、事先要进行过细的定标，求出回归方程中的待定系数，且仪器也比较贵，引起误差的因素也较多，所以尚难推广。

　　直至今日为各国、各行业、各学科公认的氮蛋白质测定方法是1883年丹麦科学家厂JohanKJeldahl创立的，被后人命名为凯氏(K氏)定氮法，被许多国际组织定为标准方法，如国际谷物化学协会、美国分析化学协会，美国谷物化学协会等，我国十多年来颁布的有关“谷物、豆类作物种子粗蛋白测定”，“上壤肥料全氮测定”，以及食品、饲料工业中的蛋白质测定等等，都将凯氏定氮蛋白质方法定为标准化分析方法。该方法创立100多年来，其原理、步骤没有多大变化，但随着仪器仪表工业的发展，凯氏法所涉及的消煮、蒸馏、滴定这三步骤所用的仪器设备都已相当完备，且从手工操作发展到半自动和全自动，大大提高了测定速度和精度，也改善了工作条件，使凯氏定氮法进人了一个新阶段。

　　一、凯氏定氮/蛋白质的原理和主要部件

　　凯氏法的原理是将待测样品放在高温浓硫酸中消煮分解，使样品中的蛋白氮及其他有机氮转化为钱态氮，然后加碱蒸馏，使氨释放出来并吸收于标准酸中，再用滴定法测定全氮量，进而可换算出蛋白质含量，所以，凯氏法和主要部件分为3部分。