高效液相色谱仪的管理与维护

　　1　引　言

　　半个世纪以来,随着科学技术的不断发展,液相色谱(HPLC)仪器方法也得到了长足的发展,目前已成为影响最大、发展最快、应用广泛的现代分析 仪器之一。高精度的输液泵,应用广泛的色谱分离柱,低噪音、高灵敏度的各种检测器以及功能强大的数据处理软件系统的出现,都推动了液相色谱技术的迅猛发 展。液相色谱仪正以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐,广泛地应用于生物医药研究、环境监测和食品检测等领域。我们在应用 先进的HPLC技术进行各种科研工作中,为保证分析结果的科学性和准确性,必须重视和加强对液相色谱仪的管理和维护。只有良好规范的管理(GLP),才能 使仪器处于最佳工作状态,保证各项分析工作顺利完成,得出的实验数据才最真实可靠。我们希望通过本文的技术交流,能使广大液相色谱工作者不仅掌握液相色谱 技术,还能管理和维护好液相色谱仪。

　　2　液相色谱仪流路泵系统的管理与维护

　　液相色谱仪的流路系统主要是由输液泵和连接管道组成。输液泵的主要作用是把流动相和样品带入色谱柱中,使样品在色谱柱固定相和流动相之间作用并实现分离。因此,正确配制流动相,维护好泵体和连接管路,对保证输液泵的流量精度和保留时间(tR)的重复性十分重要。

　　2.1流动相的配制和准备

　　2.1.1溶剂的纯化

　　在高效液相色谱分析中,正相色谱以已烷作为流动相的主体,二氯甲烷、氯仿、乙醚作为改性剂;反相色谱以水作为主体,以甲醇、乙腈、四氢呋喃作为改性剂。HPLC分析均应使用HPLC级纯度的溶剂,AR级的溶剂可能会由于杂质的存在而出现鬼峰。

　　正相色谱分析中使用的己烷、二氯甲烷、氯仿、乙醚中经常含有微量的水分,这会改变液固色谱柱的分离性能,使用前应用球形分子筛柱脱去水分。反相色谱分析中使用的甲醇、乙腈、四氢呋喃,不必脱除微量水,但甲醇、乙腈等使用前最好经硅胶柱净化,去除具有紫外吸收的杂质。

　　要保证配制流动相用水的纯度足够高。由于去离子水通常含有一些有机物,所以不适合用于HPLC分析用,最好使用超纯水(电阻率18MΩ. cm)。如果条件有限,可将去离子水再次蒸馏,现用现蒸,保持新鲜,还能脱去CO2,使用效果也不错。

　　2.1.2缓冲溶液

　　有些分析需要用到缓冲盐的流动相,配制时盐试剂要用AR级以上、没有污染、过期;现用现配,不要储存时间过长,避免pH值发生变化和成分分解, 影响色谱分离的效果。缓冲盐的流动相最好能在实验室自己配制,商品化的流动相可能会添加有硫代硫酸钠稳定剂,会影响缓冲液的光学和色谱性能。