新型三维可调共聚焦激光诱导荧光检测器的研制与评价

    激光诱导荧光检测是目前灵敏度最高的检测技术之 一^［１］，其 最 小 检 出 量 可 达 到ａｍｏｌ级^［２］甚 至ｚｍｏｌ级^［３］；与其他检测方法联用在痕量物质检测方面具有非常大的优势^［４］，现已被广泛应用在生命科学、环境监测和食品安全等领域^{［５－９］}。

    共聚焦结构是激光诱导荧光检测器（ｌａｓｅｒ－ｉｎ－ｄｕｃｅｄ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ＬＩＦＤ）广泛采用的光路系统。相 对于正交型光路系统，该结构仅需一套光路系统，结构简单，通过荧光收集系统将非样品特异性荧光的杂散光屏蔽。但是该结构对光路调节要求严格，激发光和发射 光同轴性的较小偏差都会在较大程度上影响检测器性能。因此在该类检测器的设计过程中，人们追求激发光和发射光路的同轴精度的提高，同时增加光路系统的密闭 性，以此来提高检测器的灵敏度^{［１０，１１］}。

    本研究组曾以蓝光固体激光器为光源，使用反射式检测池，研制了一种新型液相色谱激光诱导荧光检测器^［１１］。本文在上述检测器基础上，引入反射镜和二色镜的高精度三维调节架，提高了入射光与发射光的同轴精度；同时采用模块化光路系统设计，加强其密闭性，减少系统杂散光，以进一步提高检测器的性能。

    １实验部分

    １．１　仪器与药品

    ＬＤ－ＤＰＳＳＬ激光器（４７３　ｎｍ，３０　ｍＷ，长春新产业光电有限公司）；Ｈａｍａｍａｔｓｕ　Ｒ９２８光电倍增管（ＰＭＴ）；全反光镜、二色镜、 干涉滤光片（沈阳汇博光学技术有限公司）；透镜（北京卓立汉光仪器有限公司）等。Ｐ１２０１高压恒流泵、模拟／数字（Ａ／Ｄ）适配器、ＥＣ２００６色 谱 数 据 处 理 工 作 站 和ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２色谱柱（１５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ）均为大连依利特分析仪器有限公司产品。

    乙腈为色谱纯，磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和乙酸铵为分析纯；异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）、腐胺、组胺和亚精胺标准品均购自Ｓｉｇｍａ公司；实验用水均为Ｍｉｌｌｉ－Ｑ超纯水。

    １．２　实验方法

    １．２．１　ＦＩＴＣ评价检测器性能

    用丙酮溶解ＦＩＴＣ，乙腈定容配成１　ｍｍｏｌ／Ｌ标准液，使用时用乙腈稀释至所需浓度。

    色谱条件：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　ＯＤＳ２色谱柱；流动相为５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ８．０）－乙腈（７５∶２５，ｖ／ｖ）；流量为１．０　ｍＬ／ｍｉｎ；室温下进样２０μＬ。