超声对益母草茎内组织损伤与总碱产率关系研究

　　益母草总生物碱是中药唇形科植物益母草中所含的总有效成分,常用传统方法(回流法等)提取,其用时长、产率低,且需加热.随着超声技术的发展,利用超声提取药材中化学成分已成为新技术应用于提取的方法之一.近年来国内外报道已有很多小样品实验,并取得了满意的效果[1~7].我国还把超声提取作为鉴别和测定药材、药品中化学成分含量而制备供试样液的一种方法规定在药典上[8].有关学者已从理论上阐述了超声提取的机理[9~10].本文以提取益母草总生物碱的实验为例,进一步探讨超声提取的机理,为超声用于药材中化学成分提取提供实验依据.

　　1 材料与方法

　　1.1 材料和仪器

　　超声发生器(频率为20kHz),721型分光光度计(上海第三分析仪器厂),扫描电镜(日立S-570型),益母草粉(50目)和益母草小茎节(购于西安市吴家坟中药店),雷氏盐、乙醇、丙酮、盐酸等试剂.

　　1.2 实验方法

　　取益母草粉20g,加入体积比为95%的乙醇30mL,分别用回流法和超声法提取不同时间,过滤.再将滤液在水浴上蒸干,在蒸干物中加0.1mol.L^-1盐酸10,8,6,4mL,再缓缓加入新配制的体积比为2%的雷氏盐6mL,放置冰箱过夜,过滤,沉淀.用10mL冰水分次洗涤至无色,抽干,再沉淀.然后用丙酮溶解于10mL容量瓶中,以丙酮为空白,分别在分光光度计510nm波长处测其吸光度,代入文献[11]提出的雷氏盐比色法测得的丙酮浓度与吸光度A的线性关系方程:

　　式中W为益母草总生物碱的重量(mg),179.63为益母草中含量较多的水苏碱盐酸盐(C7H13NO2HCl)的分子量,10为所取丙酮溶液的体积(mL),A为在波长510nm处所得的吸光度,106.5为硫氰酸铬铵在丙酮中的克分子吸收系数.将其滤液用层析法作层析图.同时将益母草茎节用浸泡法提取24h或超声提取30min,以原益母草茎节作对照,经镀膜,然后利用扫描电镜观察照相.依据电镜和层析图分析茎内组织损伤和提取益母草总碱成分产率的关系.

　　2 实验结果

　　2.1 不同提取方法提取不同时间对

　　益母草总碱产率的影响分别吸取回流提取1,2,3 h和超声提取10,20,30,40,50,60 min所提取的样品各2,4,6,8mL于烧杯,再分别加入0.1mol.L^-1盐酸10,8,6,4mL,并加入新配制的雷氏盐溶液各6 mL,按上述实验方法配制溶液.在分光光度计上测得吸光度,求得四次测得的平均产率及标准差,结果见表1.

　　2.2 不同提取法提取益母草总碱后茎内损伤情况

　　将浸泡24h和超声提取30min后的益母草茎节同原茎节经扫描电镜观察和照相,得益母草茎内组织的电镜扫描照片,如图1所示.

　　3 分析与讨论