紫外-可见分光光度计透射比准确度对测量结果影响的探讨

　　紫外-可见分光光度计是一种现代化的集光、机、电、计算机为一体的分析仪器,它广泛应用于有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医疗卫生、环境保护、生命科学等领域;它将对研究人类的生存,发展和生态平衡提供有力的保障。如何正确理解紫外-可见分光光度计的各项关键指标并正确使用,对我们的分析有着重要意义。在工作中经常遇到不同的单位或同一单位用两台经过计量检定合格的紫外-可见分光光度计对同一被测样品进行测量,经过比较测量结果偏差较大,从而无法定论。实际上他们没有注意到不同的仪器在吸光度不同的使用范围,仪器的透射比(吸光度)准确度对测量结果的影响是不一样的。下面试述两台经过计量检定合格的紫外-可见分光光度计透射比准确度对测量结果的影响。

　　众所周知,紫外-可见分光光度计是根据物质的分子对紫外、可见区辐射(光)产生的吸收光谱和著名的朗伯-比耳定律测量物质的性质和含量的分析仪器。它可以用下面的数学公式描述:

　　朗伯-比耳定律是光度分析中定量分析的最基础、最根本的依据。从理论上说,朗伯-比耳定律只适用于单色光,均匀、相互独立的无相互作用的吸收粒子体系,因此非单色光,化学因素,杂散光,及测定时的温度,压力、光学传感器的非线性、电子学的噪声、仪器的光谱带宽等都可引起朗伯-比耳定律的偏离。在实际工作中,除了要注意测试波长和参比溶液的选择外,若被测样品的吸光度太大(浓度太高)或太小(浓度太稀),都可能产生朗伯-比耳定律的偏离。

　　如按照JJG375-1996《单光束紫外-可见分光光度计》和JJG682-1990《双光束紫外-可见分光光度计计》计量检定规程要求,目前我国评价高精度紫外-可见分光光度计仪器的透射比准确度在±0.5%τ范围内,则该仪器合格。表1列出了一台仪器的透射比准确度为+0.5%τ,一台仪器的透射比准确

度为-0.5%τ的两台仪器在2%-98%的透射比范围内测量结果之间的比较。

　　通过上面数据可以看出,当一台仪器透射比准确度为正误差极限,和另一台仪器透射比准确度为负误差极限,并且透射比大于80%τ(吸光度小于0.071A),或小于10%τ(吸光度大于1.301A)时,两台仪器测量结果的相对误差较大,因此一般的紫外-可见分光光度计不适合高浓度和极低浓度的分析,因此应该通过改变待测样品的浓度或改变吸收池厚度,是被测样品的吸光度处在适当的范围内,才能使两者测量数据较为一致性。

　　作者：杨禹哲　丁　勤(江西省计量测试研究院,南昌　330002)