CS-Ⅰ型低温工作台
众所周知,用扫描电镜观察生物样品,过去采取的常规方法是先对样品进行“脱水”处理。传统的临界点干燥或冷冻干燥处理,不仅手续繁复,处理时间长(数小时或长达2一3天),更严重的还使样品分别出现20%一70%的收缩。此外,样品在脱水与干燥的过程中,由于溶液的作用,还会造成部分结构的干瘪和损伤。如果在扫描电镜上配备低温工作台,冷冻固化可在几秒钟内完成,不但制样快,而且可以在不丢失水份的情况下观察样品。由于这种越低温瞬间冷冻,生物样品的组织液中,仍保存着离子和电解物质,使样品保持原有的导电性,从而能观察到清晰的、没有失去细胞成分的、凝固的“活细胞”状态,进而获得生物等含水样品接近于自然状态下的放大图像。处于电子束轰击下仍然保持在低温的样品,幅射损伤也小。如阴极荧光测量中,为了增强荧光信号,需要加强人射电子束,使用低温工作台就十分有利。此外,对于液态油脂的低温观察;半导体材料及其它低温试样的观察,也都可以应用低温工作台。
我们自行设计制造了CS一I型多功能低温工作台,可配备在KYKY一AMRAY一1000B扫描电镜上,这是继扫描电镜国产化后首次推出的扫描电镜大型附件装置。
CS一I型低温工作台由速冻器、样品制备室、试样台及电控箱四部分组成,简介如下:
速冻器与样品转移组件如图1示。其中(1),(4)为样品转移组件,(5),(6)为速冻器的零件。样品转移组件上有两个拉杆,(3)长杆为送样杆,送样杆可拧人样品托(4),短杆可拉转一片状阀门(1),(也可见图2)。制样时在样品转移组件的长杆上装好样品托及样品,液氮罐(5)中注人液氮,将样品转移组件盖在速冻器上,通过管道(6)抽真空1一2分钟,可透过样品转移组件上的有机玻璃隔板,见液氮已成为一213℃的絮状氮冰,即可推入长杆,使样品在疏松的氮冰中聚冷十几秒钟,拉长杆人转移组件的小室中,转拉短杆的片状阀门,使样品处在转移组件的真空密封小室中,再由管道(b)放气,此时可将样品转移组件从速冻器上取下,转移到样品制备室上。
样品制备室及试样台装在扫描电镜的试样室上,如图3示,样品制备室在试样室的左面,试样台装在正面。都与电镜的高真空系统连通,并分别带有使样品保持低温的液氮罐(1),(6)。图4为装有CS一I型低温工作台的KYKY一AMRAY一I000B扫描电镜。
样品制备室(以下简称制备室),是生物等含水样品做低温观察前的制样室,图5和图6分别为制备室结构示意图及照片。样品座(4)及冷刀(3)由液氮罐(5)用热传导制冷,样品座上装有热电偶,以备随时测温(实测温度为一110℃),液氮罐(5)中,一次可注人液氮340毫升,冷刀由球铰手柄操作,使用灵活。设计时还考虑装置热灯丝(6),作为幅射的热源,以便去除样品表面的结霜和升华蚀刻,使之呈浮雕状,从而获得更清晰的图象。与热灯丝并排的窗口可设金属蒸镀装置。碟阀(2)和三位四通阀(9),用于更换样品过程中,使样品座总处于真空室内。当样品转移装置送人样品时,碟阀如图(4)的虚线所示,它与转移装置间是一预抽室,碟阀的右面是高真空室,置三位四通阀如图示位置时,对预抽室抽低真空1一2分钟,便可打开碟阀,推人拉杆,将样品送人样品座,就可以切割、蚀刻或蒸金,然后打开插板阀(7),继续推拉杆,把样品送人电镜试样室,即可进行观察。
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