普通照相机(RICOH3000)在显微摄影中的应用

    专业的医用照相机在显微摄影中拍摄组织学切片已被广泛应用,但普通照相机较少应用在显微摄影中拍摄组织学切片。为探讨普通照相机在拍摄组织学切片时的效果,我们进行了大量实验性拍摄,并取得了初步成功。现报告如下。

    1 设备与器材

    1.1 设备:照相机(RICOH3000); OLYMPUSBx-51显微镜(附显微摄像接口)

    1.2 器材: Kodak100DX胶卷

    2 方法与步骤

    2.1 校正显微镜光路达最佳状态。即通过显微镜目镜观察切片显像自然、清晰。

    2.2 将20@物镜移进光路,并将LDB滤色片移进光路。通过目镜对样品进行对焦。

    2.3 将光强预置为9档,快门速度在10c、5c、1c、1/2c、1/4c、1/15c、1/30c、1/60c、1/125c、1/250c、1/500c、1/1000c时分别拍摄(光圈是固定的,为最大值)。

    2.4 将光强分别预置为3、6、8、9、10、11、12数值刻度时重复213步骤。

    2.5 分别在4×、10×、40×、100×物镜下重复2.3~2.4步骤。

    2.6 在专业医用显微摄影设备上拍摄4×、10×、20×、40×、100×组织学切片像片,作为对照。

    3 结  果

    3.1 在4×时,光强为6,快门速度为1/125秒,使用LDB滤色片,成像效果佳(见图1)。

    3.2 在10×时,光强为6,快门速度为1/125秒,使用LDB滤色片,成像效果佳(见图2)。

    3.3 在20×时,光强为6,快门速度为1/125秒,使用LDB滤色片,成像效果佳(见图3)。

    3.4 在40×时,光强为6,快门速度为1/125秒,使用LDB滤色片,成像效果佳(见图4)。

    3.5 在100×时,光强为9,快门速度为1/60秒,使用LDB滤色片,成像效果佳(见图5)。

    3.6 专业显微摄影设备拍出的相片与普通相机拍出的相片无明显差别(见图6)。

    4 讨  论

    4.1 普通照相机在与显微镜结合进行拍摄时成像效果是可以达到专业医用显微摄影设备水平的(见图1~5)。

    4.2 相机与显微镜是通过显微)摄像接管相连的。使用时,先将相机的镜头旋下,机身与接管固定好。一般情况下,照相机在没有镜头光圈时是不会成像的,但在本实验中,相机利用了显微镜的成像系统(光路),也就是说,接管只相当于暗室而显微镜的成像系统代替了照相机的镜头,因此是可以成像的。对组织学切片样本进行调焦是否准确是能否拍出好照片的关键所在。通过肉眼由目镜对样品进行对焦,是通过调节显微镜的螺旋和观察相机取景器完成的。照相机实际成像清晰度可能与肉眼观察的清晰度存在差异。所以在肉眼调焦清楚后照相机拍出的相片可能不清楚,这需要操作人员根据经验仔细摸索,找出肉眼与机器之间的误差,使成像达到最佳效果。