电化学发光免疫分析与仪器的解析及临床应用
1 免疫分析与应用
免疫分析是从研究体液蛋白,测定血浆单个成分开始的;利用抗原—抗体的特异性结合,借助于高科技、高灵敏性的分析仪器来测定生物组织中的极微量的生理或病理物质:从小到分子量只有 300左右的内固醇激素和药物,大到分子量上百万的蛋白质等,定量分析人体及生物体内微量物质的含量,生理状态下的变异与调控因素和病理状态下的变化等等,用于现代生命科学的研究及提供全面健康信息,使得医学的诊断向病因水平方面前进了一大步;免疫分析帮助医生获取准确的诊断结果。电化学发光免疫分析目前在临床主要有如下方面的应用:
1.1 激素、生物活性肽、各种特定蛋白的含量测定主要包括甲状腺功能的 8 个参数,内分泌性激素等。
1.2 肿瘤的早期诊断
包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA),肿瘤标记物等。
1.3 传染性疾病的病原诊断
定量测定乙肝五项指标及艾滋病的病原体。乙肝病毒表面抗原抗体是乙肝感染后,重要的评价治疗是否有效,机体免疫功能的指标,是最重要的血清学标志,常规酶法有可能使部分低病毒含量携带者漏检。电化学发光分析仪可在 18 min 内定量检测,而且检测灵敏度达到 0.01- 0.04 μ/ml。对于高浓度样品也无须稀释,线性可达 1000iu/L,可以帮助医生有效识别急性、慢性乙肝病毒感染和进行病程监控。
1.4 某些病的特征标记物的测定
如心肌标志物:肌钙蛋白 T、肌红蛋白和肌酸激酶- 同功酶定量测定,糖尿病的胰岛素定量测定等。
1.5 贫血诊断的铁蛋白、叶酸、维生素 B12 等项目。
1.6 过敏反应
免疫球蛋白 E(IGE)的定量检测,IGE 在过敏反应中有主要意义,但在特定年龄段人群 IGE 含量变化较大,测量 IGE 在血清或血浆中的含量主要与其它临床检查联合应用才有实际意义。
2 电化学发光免疫分析技术
现代免疫分析技术都使用各种不同的标记物与待测物质进行全量反应,利用标记物的放大效应,以便达到定量测定出超微量物质的目的,而电化学发光免疫分析技术是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。包括电化学和化学发光两个过程。化学发光剂三联吡啶钌和电子供体三丙胺,在阳电极表面同时各失去一个电子发生氧化反应,二价的三联吡啶钌变成三价的,而三丙胺被氧化成阳离子自由基,两者高反应基团在电极表面迅速反应,它们之间存在的高电化学电位差,使三联吡啶钌变成激发态;再衰减成基态时,同时发射一个波长 620nm的光子,这一过程在电极表面反复进行,产生许多光子,使光信号得以增强,以这种技术而生产的仪器,已经使微量免疫分析走向全自动化、快速、无干扰、检测稳定、线性范围宽的新阶段。
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