无菌接种器具快速消毒装置的研究初报
无菌操作是在医药、动植物组织培养、微生物工程、细胞工程及分子生物学等领域的关键技术。目前已知的接种器具的消毒方式为酒精灯火焰法。但是酒精灯升温速度较慢,工作效率低。燃烧时所释放的二氧化碳、甲醇等有毒气体在工作台密闭的空间内容易蓄积,危害人体健康。酒精灯还具有一定的火险,容易引起事故。而采用基于电热丝的传导加热式消毒,升温速度与导热速度慢。为保持高温,加热单元必须长期工作,电能浪费严重,限制了推广。
实用新型专利 CN200620080704.5“无菌操作接种器具快速消毒装置”(以下简称消毒装置)就是针对以上不足所开发的一种新型实验装置。该消毒装置基于辐射聚焦式加热,具有升温迅速、节能环保的特点。本研究利用该专利的实验型样品与酒精灯火焰进行消毒效果比较,以便于为进一步的专利改进提供技术依据。
1 研究内容与方法
1.1 升温速度与最高温度值比较
1.1.1 消毒装置温度测定方法
将pt1000铂电阻温度传感器与FLUKE 80V连接,利用夹具固定后伸入消毒装置的加热内腔中的焦点位置上,然后开启消毒装置的电源开关。功率设定为500瓦和250 瓦。从0 - 20s 每隔1s 记录温度值。
1.1.2 酒精灯温度测定方法
将pt1000铂电阻温度传感器与FLUKE 80V连接,利用夹具固定后伸入消毒装置的酒精灯的外焰位置上。从0 -20s 每隔1s 记录温度值。
1.2 灭菌效果比较
消毒灭菌效果:将接种镊子在大肠杆菌浓度为104 个/ml 的菌悬液中浸泡一下,然后利用消毒装置在 250 瓦、500 瓦功率及酒精灯火焰下下消毒 5s,10s,15s 后,在培养基上划一条 5 厘米长的线。培养 10 天后进行菌落计数。
2 研究结果与分析
2.1 升温速度与最高温度值比较
分析以上数据得到如下结果:消毒装置的升温曲线接近对数增长模式,在 2 5 0 瓦功率下曲线为y = 61.476Ln(x) - 49.522(R2 = 0.9942)。2s时达到100℃,12s时达到200℃,最高温度为232℃。250瓦功率下升温缓慢,而且最高温度不能满足消毒的需要。
在500瓦功率下曲线为y = 109.25Ln(x) - 87.626(R2 =0.98)。1.2s时就可以达到100℃,3s时达到200℃,6s时达到300℃,最高温度为393℃。500瓦功率下升温迅速,最高温度能满足消毒的需要。
而酒精灯加热的升温曲线接近于多项式 y =0.0059x3 - 0.351x2 + 10.871x + 4.2345(R2 = 0.9994),3s 时达到100℃,在9s 时达到200℃,在13s时达到300℃,在25s 时达到400℃,虽然最高温度483℃能够满足消毒的需要,但升温缓慢。
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