蛋白质晶体结构的研究
应用电子显微学方法研究蛋白质薄晶体结构,通常使用负染色方法。然而它存在缺陷:负染色剂在电子束照射下会发生变化,如醋酸铀体积减少达15%,这会引起蛋白质表面移动(P.Un-win)。其次由于负染色液与氨基酸残余侧链基因的化学作用。会出现正的或负的染色,使得图象难以解释(W.Chiu)。最后负染色的样品大约只能获得15-20 的分辨率。如不进行染色,也有问题:象衬度非常弱;存在真空损伤—蛋白质从含水状态到电镜真空中,因干燥而引起损伤;最后是幅射损伤—蛋质晶体对电子束非常敏感,典型的蛋白质晶体,大约在le/ 的电子剂量时就开始被破坏(Stenn)。这样的剂量远小于通常观察时的剂量。为解决这些问题,A.Klug等人采用下列方法:用相位衬度成象;用葡萄糖取代水介质,由于葡萄糖不挥发,有利于真空保存,同时不含重原子,不妨碍蛋白质内部结...
凯氏氮/蛋白质测定法及其仪器评介
氮和蛋白质是一切生命活动的基础物质,是动植物和人类生存的最重要营养成分,所以在农业、畜牧业、食品工业、饲料工业等部门都十分重视氮/蛋白质的测定分析。早在150多年前,人们就在探索氮/蛋白质测定方法和仪器,如今较成熟的方法有杜马斯(Dumas)法、‘护子活化法、染料结合法、近红外光谱法和凯氏法(KJeldahl)等等。
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