应用高分辨电镜技术研究生物大分子结构的主要障碍是未染色的样品对辐射损伤的高度敏感性。le/ 的电子剂量，就会损伤样品。低剂量技术是防止辐射损伤的主要方法。低剂量技术要求电镜应能探测极低剂量的束流(如 )，并能进行轴外聚焦。目前多数商品电镜达不到要求，因而需要改装。我们对JEM--100CX/fl电镜进行了三处改装:

应用电子显微学方法研究蛋白质薄晶体结构，通常使用负染色方法。然而它存在缺陷:负染色剂在电子束照射下会发生变化，如醋酸铀体积减少达15%，这会引起蛋白质表面移动(P.Un-win)。其次由于负染色液与氨基酸残余侧链基因的化学作用。会出现正的或负的染色，使得图象难以解释(W.Chiu)。最后负染色的样品大约只能获得15-20 的分辨率。如不进行染色，也有问题:象衬度非常弱;存在真空损伤—蛋白质从含水状态到电镜真空中，因干燥而引起损伤;最后是幅射损伤—蛋质晶体对电子束非常敏感，典型的蛋白质晶体，大约在le/ 的电子剂量时就开始被破坏(Stenn)。这样的剂量远小于通常观察时的剂量。为解决这些问题，A.Klug等人采用下列方法:用相位衬度成象;用葡萄糖取代水介质，由于葡萄糖不挥发，有利于真空保存，同时不含重原子，不妨碍蛋白质内部结...